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    微生物ELISA试剂盒在处理方法上主要有以下两种

    发布时间: 2020-07-30  点击次数: 32次
      微生物ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
     

      微生物ELISA试剂盒的液体样本处理方法:
      液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右,如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
      1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心;
      2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心;
      3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心;
      4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心;
      5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心;
      6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心;
      7、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
     
      固体样本处理方法:
      固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
      1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右,仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
      2、细胞内蛋白样本:
      许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
      a、培养的细胞:
      ①、动物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      ②、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右,仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      b、组织的细胞:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右,去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。